Amidáz (AMD)
Enzimek:Makromolekuláris biológiai katalizátorok, a legtöbb enzim fehérje
Amidáz:Katalizálják különféle endogén és idegen alifás és aromás amidok hidrolízisét egy acilcsoport vízbe átvitelével szabad savak és ammónia képződése közben. A hidroxámsavakat és más szerves savakat széles körben használják gyógyszerként, mivel növekedési faktorok, antibiotikumok és tumorgátlók alkotóelemei. Az amidázok a katalizátor sztereoszelektivitása szerint R- és S-típusú acilázokra oszthatók.
Az amidok hidrolízisének katalizálása mellett az amidáz katalizálhatja az acilátviteli reakciókat is ko-szubsztrátok, például hidroxil-amin jelenlétében.
A különböző forrásokból származó amidázok eltérő szubsztrátspecificitással rendelkeznek, némelyikük csak aromás amidokat képes hidrolizálni, mások csak alifás amidokat, és vannak α- vagy ω-amino-amidokat hidrolizáló enzimek is. A legtöbb aminok csak aciklusos vagy egyszerű aromás amidokra mutatnak jó katalitikus aktivitást, de komplex aromás vegyületek, heterociklusos amidok, különösen az orto-szubsztituenseket tartalmazó amidok esetében általában alacsony az aktivitás (csak néhány enzim mutat jobb katalitikus hatást).
Katalitikus mechanizmus:
| Enzimek | Termékkód | Termékkód |
| Enzimpor | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | 19 amidázból álló készlet, egyenként 50 mg 19 darab * 50 mg / darab, vagy más mennyiség |
| Szűrőkészlet (SynKit) | ES-AMD-1900 | 19 amidázból álló készlet, mindegyik 1 mg 19 tétel * 1mg / tétel |
★ Magas szubsztrátspecificitás.
★ Erős királis szelektivitás.
★ Magas konverziós hatékonyság.
★ Kevesebb melléktermék.
★ Enyhe reakciók.
★ Környezetbarát.
➢ Az enzimek szűrését specifikus szubsztrátok esetén kell elvégezni a szubsztrátspecificitás miatt, és olyan enzimet kell találni, amely a legjobb katalitikus hatással katalizálja a célszubsztrátot.
➢ Soha ne érintkezzen szélsőséges körülményekkel, például: magas hőmérséklet, magas/alacsony pH-érték és nagy koncentrációjú szerves oldószerek.
➢ Normális esetben a reakciórendszernek tartalmaznia kell szubsztrátot és pufferoldatot (az enzim optimális reakció pH-ja). Ko-szubsztrátok, például hidroxil-amin jelenléte szükséges az acilátviteli reakciórendszerben.
➢ Az AMD-t utoljára kell hozzáadni a reakciórendszerhez, optimális reakció pH-érték és hőmérséklet mellett.
➢ Az AMD minden típusának más optimális reakciófeltételei vannak, ezért mindegyiket külön-külön kell tovább vizsgálni.
1. példa(1):
Hidrolízis aktivitás különböző amid szubsztrátokra
| Hordozóanyag | Konkrét tevékenység μmol perc-1mg-1 | Hordozóanyag | Konkrét tevékenység μmol perc-1mg-1 |
| Acetamid | 3.8 | ο-OH-benzamid | 1.4 |
| Propionamid | 3.9 | p-OH-benzamid | 1.2 |
| Laktamid | 12.8 | ο-NH2benzamid | 1.0 |
| Butiramid | 11.9 | p-NH2benzamid | 0,8 |
| Izobutiramid | 26.2 | ο-Toluamid | 0,3 |
| Pentánamid | 22.0 | p-Toluamid | 8.1 |
| Hexánamid | 6.4 | Nikotinamid | 1.7 |
| Ciklohexánamid | 19,5 | Izonikotinamid | 1.8 |
| Akrilamid | 10.2 | Pikolinamid | 2.1 |
| Metakrilamid | 3.5 | 3-fenilpropionamid | 7.6 |
| Prolinamid | 3.4 | Indol-3-acetamid | 1.9 |
| Benzamid | 6.8 |
A reakciót 50 mM nátrium-foszfát pufferoldatban (pH 7,5), 70 °C-on végeztük.
| Amidok | Hidroxilamin | Hidrazin |
| Acetamid | 8.4 | 1.4 |
| Propionamid | 18.4 | 3.0 |
| Izobutiramid | 25.0 | 22.7 |
| Benzamid | 9.2 | 6.1 |
A reakciót 50 mM nátrium-foszfát pufferoldatban (pH 7,5), 70 °C-on végeztük.
Kapcsolódó reagenskoncentrációk: amidok, 100 mM (benzamid, 10 mM); hidroxil-amin és hidrazin, 400 mM; enzim 0,9 μM.
2. példa(2):
3. példa(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S. et al. Extremophiles, 2001, 5:183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR és munkatársai. Folyamatbiokémia, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM és mások. Bioorganikus kémia, 2017, Online elérhető 7.
