amidáz (AMD)
Enzimek:A makromolekuláris biológiai katalizátorok, a legtöbb enzim fehérje
Amidáz:Különféle endogén és idegen alifás és aromás amidok hidrolízisének katalizálása egy acilcsoport vízbe történő átvitelével szabad savak és ammónia előállításával.A hidroxámsavakat és más szerves savakat széles körben használják gyógyszerként, mivel növekedési faktorok, antibiotikumok és tumorgátlók összetevői.Az amidázok a katalizátor sztereoszelektivitása szerint R típusú és S típusú acilázokra oszthatók.
Az amidok hidrolízisének katalizálása mellett az amidáz aciltranszfer reakciókat is katalizálhat társszubsztrátok, például hidroxil-amin jelenlétében.
A különböző forrásokból származó amidázok eltérő szubsztrátspecifitással rendelkeznek, egy részük csak aromás amidokat, van, amelyik csak alifás amidot, más részük pedig α- vagy ω-amino-amidokat hidrolizál.Az aminok többsége csak az aciklusos vagy egyszerű aromás amidok esetében jó katalitikus aktivitással rendelkezik, de az összetett aromás vegyületek esetében a heterociklusos amidok, különösen az orto-szubsztituenseket tartalmazó amidok általában alacsony aktivitásúak (csak néhány enzim mutat jobb katalitikus hatást).
Katalitikus mechanizmus:
| Enzimek | Termékkód | Termékkód |
| Enzim por | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | egy készlet 19 amidázból, egyenként 50 mg 19 darab * 50 mg / tétel, vagy más mennyiség |
| Screening Kit (SynKit) | ES-AMD-1900 | egy készlet 19 amidázból, egyenként 1 mg, 19 tétel * 1 mg / tétel |
★ Magas szubsztrátspecifitás.
★ Erős királis szelektivitás.
★ Magas konverziós hatékonyság.
★ Kevesebb melléktermék.
★ Enyhe reakciókörülmények.
★ Környezetbarát.
➢ A szubsztrátspecifitás miatt specifikus szubsztrátokra enzimszűrést kell végezni, és olyan enzimet kell kapni, amely a legjobb katalitikus hatással katalizálja a célszubsztrátot.
➢ Soha ne érintkezzen extrém körülményekkel, mint például: magas hőmérséklet, magas/alacsony pH-érték és nagy koncentrációjú szerves oldószer.
➢ Normális esetben a reakciórendszernek tartalmaznia kell szubsztrátot, pufferoldatot (Az enzim optimális reakció pH-ja).A ko-szubsztrátumoknak, például a hidroxil-aminnak jelen kell lenniük az aciltranszfer reakciórendszerben.
➢ Az AMD-t utoljára kell hozzáadni a reakciórendszerbe az optimális reakció pH és hőmérséklet mellett.
➢ Mindenféle AMD különböző optimális reakciókörülményekkel rendelkezik, ezért mindegyiket külön-külön kell tovább vizsgálni.
1. példa(1):
Hidrolízis aktivitása különböző amid szubsztrátumokra
| Szubsztrát | Konkrét tevékenység μmol min-1mg-1 | Szubsztrát | Konkrét tevékenység μmol min-1mg-1 |
| Acetamid | 3.8 | ο-OH-benzamid | 1.4 |
| Propionamid | 3.9 | p-OH-benzamid | 1.2 |
| Laktamid | 12.8 | ο-NH2benzamid | 1.0 |
| butiramid | 11.9 | p-NH2benzamid | 0.8 |
| Izobutiramid | 26.2 | ο-Toluamid | 0.3 |
| Pentanamid | 22.0 | p-Toluamid | 8.1 |
| hexánamid | 6.4 | Nikotinamid | 1.7 |
| Ciklohexánamid | 19.5 | izonikotinamid | 1.8 |
| Akrilamid | 10.2 | Picolinamid | 2.1 |
| Metakrilamid | 3.5 | 3-fenil-propionamid | 7.6 |
| Prolinamid | 3.4 | Indol-3-acetamid | 1.9 |
| benzamid | 6.8 |
A reakciót 50 mM nátrium-foszfát pufferoldatban (pH 7,5) 70 °C-on hajtottuk végre.
| Amidok | Hidroxil-amin | Hidrazin |
| Acetamid | 8.4 | 1.4 |
| Propionamid | 18.4 | 3.0 |
| Izobutiramid | 25.0 | 22.7 |
| benzamid | 9.2 | 6.1 |
A reakciót 50 mM nátrium-foszfát pufferoldatban (pH 7,5) 70 °C-on hajtottuk végre.
Kapcsolódó reagenskoncentráció: amidok, 100 mM (benzamid, 10 mM);hidroxil-amin és hidrazin, 400 mM;enzim 0,9 μM.
2. példa(2):
3. példa(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S. et al.Extremophiles, 2001, 5:183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR és mások.Process Biochemistry, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM és társai.Bioorganic Chemistry, 2017, online elérhető 7.
